摘要：本试验旨在探讨饲料中添加七珍素对蛋鸡生产性能、输卵管组织形态、抗氧化指标和炎症因子的影响。选取日龄左右的蛋鸡只鸡，随机分成3组，每组6个重复，每个重复60只鸡。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中分别添加g/t和g/t七珍素。预试期7d，正式试验42d。试验结果表明：1.七珍素可提高蛋鸡产蛋率、平均日产蛋量，降低无壳蛋率、沙皮蛋率、脏蛋率、水纹蛋率；2.七珍素能减少蛋鸡输卵管膨大部的炎性灶，并能显著提高输卵管峡部的分泌功能；3.与对照组相比，g/t七珍素组能显著提高输卵管膨大部、峡部总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量（P0.05或P0.01），显著降低丙二醛(MDA)的含量(P0.01)；4.与对照组相比，七珍素组能显著降低抑炎因子IL-4、IL-10，以及促炎因子IL-2、IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA水平的表达(P0.05或P0.01)。总之，饲料中添加七珍素能提高蛋鸡生产性能、改善蛋品质，减轻输卵管组织学病变，提高输卵管抗氧化能力以及降低输卵管的炎症因子的表达，其中对输卵管膨大部和峡部炎症改善作用更显著。
关键词：七珍素，生产性能，输卵管组织形态，抗氧化，炎症因子，蛋鸡
近年来，随着育种水平的不断提升，蛋鸡产蛋性能越来越高，产蛋周期也越来越长。但实际生产中，蛋鸡产蛋后期鸡蛋壳品质越来越差，暗斑蛋等现象越来越突出。研究表明，蛋壳的品质取决于输卵管结构和功能，由疾病或环境因素导致的输卵管氧化损伤或炎症是蛋壳品质变差的重要原因。
七珍素由山银花提取物和姜*提取物按一定的比例复配而成，主要成分是绿原酸和姜*素。绿原酸和姜*素具有抗炎、抑菌、抗氧化的作用。研究发现，日粮中添加姜*素可以通过降低过氧化产物的堆积缓解免疫应激对仔猪肠道的损伤，从而提高肠道消化吸收的能力。饲料中添加姜*素能够提高蛋鸡的生产性能，增加经济效益[1]。但是，添加绿原酸和姜*素是否可以缓解蛋鸡输卵管炎症、改善蛋壳品质，目前并不清楚。本试验通过在饲料中连续添加七珍素，探求其对蛋鸡输卵管形态，抗氧化和炎症的影响，为提高蛋鸡后期蛋壳品质提供理论依据和实践指导。
1材料与方法1.1试验材料
七珍素由北京生泰尔科技股份有限公司提供
1.2试验设计与处理
选择日龄左右的蛋鸡约只鸡，按产蛋率随机分为3个组；每组6个重复，每个重复60只鸡。采用单因子随机区组试验设计，设基础饲粮（空白对照组）、g/t七珍素组、g/t七珍素组。预饲期7d，正式试验期42d。
1.3试验动物及饲养管理
试验蛋鸡饲养在全封闭式的蛋鸡舍四阶梯式金属笼中间两层，鸡笼的每一层相连的15个小笼作为1个重复(60只鸡)，各处理鸡重复间的排列考虑位置效应。机械通风，光照时间16h/d，舍内温度18-23℃,相对湿度为40%-60%。
1.4测定指标与方法
1.4.1生产性能：试验进行过程中，每周测定蛋鸡产蛋量、平均蛋重和产蛋率。每天记录各个重复的鸡只死淘率、畸形蛋率、脏蛋率、软壳蛋率、水纹蛋率和破蛋率等（每个重复的鸡蛋全部收集）。
于试验的第42d，每个重复随机取2只进行剖杀，分离输卵管，膨大部、峡部、子宫部按东南西北区分别取样，样品1cm×1cm置于10%中性福尔马林固定，另外0.5cm×0.5cm经液氮冷冻后-80℃保存，刮取输卵管各部位黏膜，完成以下指标测定：
1.4.2输卵管组织学观察：输卵管各部位组织置于10%中性福尔马林固定24h以上，常规石蜡2μm切片、HE染色和PAS染色，光镜下观察。
1.4.3输卵管组织抗氧化指标总抗氧化能力T-AOC、脂质氧化MDA、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px含量。糖原PAS染色。
1.4.4输卵管炎症因子mRNA水平的测定：测定IL-2、IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10mRNA的表达量。
1.5数据统计和处理
抗氧化指标和炎症因子含量采用SAS8.03软件T-Test检验，以0.05作为显著性的检验标准。
2试验结果2.1七珍素对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响
表1七珍素对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响
七珍素对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响见表1。由表1可知，1-6周，各试验组的产蛋率均高于对照组，分别提高2.88%、2.36%，各组的平均蛋重略低于对照组；无壳蛋率方面，试验组均低于对照组；沙皮蛋率方面，g/t试验组显著低于对照组，和g/t组差异不显著；脏蛋率方面，试验组均低于对照组，分别降低0.31%和0.58%；产蛋量方面，试验组均高于对照组，分别提高2.85%和1.78%。。各试验组的水纹蛋显著降低。
2.2七珍素对输卵管组织学形态的影响
2.2.1HE染色
图1七珍素对蛋鸡输卵管各部位组织学形态的影响（HE染色）
a)膨大部；b）峡部；c）子宫部东；d）子宫部南；e）子宫部西；f）子宫部北
蛋鸡输卵管由输卵管黏膜上皮层和固有层组成，黏膜上皮由分泌细胞和柱状纤毛细胞构成，固有层由丰富的管状腺构成。膨大部固有层管状腺最为丰富，峡部管状腺腺体较膨大部小。子宫部黏膜皱襞长而复杂，固有层腺体数量明显减少，管状腺比较狭小，直接开口于管腔。HE染色结果显示，输卵管膨大部在低倍镜下，对照组可见黏膜上皮层和固有层分布大小不一、蓝染的炎性细胞浸润灶，高倍镜下可见浸润的炎性灶主要由圆形、核质比高、嗜碱性蓝染的淋巴细胞构成；而七珍素处理组黏膜上皮层和固有层结构完整，未见明显病变。，输卵管峡部，试验组与对照组无明显差异。此外，与对照组相比，g/t七珍素组输卵管子宫部东、南、西、北，固有层血管扩张淤血，内充满红细胞。揭示，与对照组相比，饲料中添加七珍素能减少蛋鸡输卵管黏膜层炎性灶，减轻蛋鸡输卵管组织学损伤。
2.2.2PAS染色组织学观察
图2七珍素对蛋鸡输卵管各部位糖原阳性细胞的表达（PAS染色）
a)膨大部；b）峡部；c）子宫部东；d）子宫部南；e）子宫部西；f）子宫部北
PAS染色结果显示，蛋鸡输卵管黏膜上皮层分泌细胞及固有层管状腺细胞内可见PAS阳性信号，在高倍镜下可见均质、紫红色、圆形的糖原颗粒。输卵管不同部位阳性信号的强弱不同。膨大部，对照组与处理组黏膜上皮层及固有层均呈阳性；峡部，对照组与处理组黏膜上皮及固有层均呈强阳性；子宫部东，对照组黏膜上皮呈阳性，处理组黏膜上皮均呈阴性；子宫部南，对照组与处理组黏膜上皮及固有层均呈阴性；子宫部西，与对照组相比，各处理组均呈阴性；子宫部北，对照组与处理组黏膜上皮及固有层均呈阴性。
图3七珍素对蛋鸡输卵管各部位糖原表达的影响
﹡﹡表示差异显著（P0.01）,﹡表示有统计学差异（P0.05）
光镜下观察PAS染色后的组织切片，每组选择3只动物，每只动物选择3张非连续切片，每张切片选择10个视野，在显微照相系统（Olympus，DP72，日本）下拍照，获得的照片在ImageProPlus6.0（MediaCybernetics，美国）软件下对每个输卵管上皮细胞中糖原阳性细胞的比例进行统计。统计结果显示，峡部，与对照组相比，g/t组糖原阳性细胞占比增加了23%（P0.01）。在本研究中发现，与对照组相比，饲料中添加七珍素能增强蛋鸡输卵管峡部黏膜层的分泌功能。
2.3七珍素对蛋鸡输卵管抗氧化能力影响
图4七珍素对蛋鸡输卵管各部位抗氧化指标的影响
P：膨大部；X：峡部；Z1：子宫部东；Z2：子宫部南；Z3：子宫部西；Z4：子宫部北
﹡﹡﹡表示差异极显著，﹡﹡表示差异显著（P0.01）,﹡表示有统计学差异（P0.05）
由图4可知，g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部的T-AOC显著高于对照组（P0.05或P0.01），子宫部东、南、西、北与control组差异不显著；g/t七珍素组输卵管峡部的MDA显著低于对照组（P0.01），膨大部、子宫部东、南、西、北与对照组差异不显著；g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部的SOD显著高于对照组（P0.01），子宫部东、南、西、北与对照差异不显著；g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部的Gpx高于对照组（P0.05），子宫部东、南、西、北与对照差异不显著。在本研究中发现，与对照组相比，饲料中添加g/t七珍素能显著提高输卵管膨大部、峡部总抗氧化能力T-AOC、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶Gpx的含量，并且显著降低丙二醛MDA的含量。
2.4七珍素对蛋鸡输卵管细胞因子mRNA水平的影响
图5七珍素对蛋鸡输卵管各部位细胞因子mRNA水平的影响
P：膨大部；X：峡部；Z1：子宫部东；Z2：子宫部南；Z3：子宫部西；Z4：子宫部北
﹡﹡﹡表示差异极显著，﹡﹡表示差异显著（P0.01）,﹡表示有统计学差异（P0.05）
由图5可知，g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部、子宫部东、西IL-4mRNA水平的相对表达量显著低于对照组（P0.05或P0.01），子宫部南、北与对照组差异不显著；g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部、子宫部东、南、西IL-10、IL-2、IL-6、IFN-γmRNA水平的相对表达量显著低于对照组（P0.05或P0.01），子宫部北与对照组差异不显著；g/t七珍素组输卵管膨大部IL-1βmRNA水平的相对表达量显著低于对照组（P0.01），子宫部西IL-1βmRNA水平的相对表达量显著高于对照组（P0.01），峡部、子宫部东、南、北与对照组差异不显著；g/t七珍素组输卵管膨大部、峡部、子宫部东、南、西、北部TNF-αmRNA水平的相对表达量显著低于对照组（P0.01）。在本研究中发现，与对照组相比，饲料中添加g/t七珍素能显著降低输卵管膨大部、峡部、子宫部细胞因子IL-4、IL-10、IL-2、IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA水平的表达。
3讨论3.1饲料中添加七珍素对蛋鸡输卵管组织学形态的影响
输卵管炎症是蛋鸡养殖中的一种常见病，多发于初产期、高产期及产蛋后期。常见病原菌是沙门氏菌和大肠杆菌，临床症状表现为出血性输卵管炎、产蛋异常、卵巢炎和腹膜炎，造成产蛋减少，严重者可引起蛋鸡死亡[2]。VARMUZOVAK[3]等人的研究表明，在饲料中添加姜*和*芩提取物可有效降低沙门氏菌肠炎鸡的肠道炎症，减少了盲肠中肠炎链球菌的数量，提高生产性能。本试验结果说明，饲料中添加七珍素能减少蛋鸡输卵管膨大部的炎性灶，并能显著提高输卵管峡部的分泌功能，说明七珍素可能有利于产蛋后期蛋鸡输卵管炎的防控。
3.2饲料中添加七珍素对蛋鸡输卵管各部位抗氧化能力的影响
氧自由基是机体正常代谢时产生的有极强氧化能力的活性原子或基团。机体不正常的代谢会产生大量的氧自由基，过量的自由基会对动物造成氧化应激，氧自由基攻击膜结构会使细胞组织结构和功能均遭到破坏[4]。已有研究证明，饲料中添加绿原酸能改善断奶仔猪机体清除自由基能力，保护细胞膜的完整性，增加机体抗氧化的能力，促进养分的吸收和利用[5]。
本试验在基础日粮中添加七珍素可有效提高蛋鸡输卵管膨大部和峡部T-AOC、SOD和GSH-Px水平，显著降低MDA的含量，从而提高机体抗氧化能力。这与在母猪[6]、肉鸡[7-9]、大鼠[10]上的研究一致。本试验结果说明七珍素可以通过增强机体抗氧化物酶活性、抑制机体氧化酶活性来缓解氧化应激，进而提高动物机体的抗氧化能力得。
3.3饲料中添加七珍素对蛋鸡输卵管各部位细胞因子mRNA表达的影响
ZHANGX[11]等人证明，绿原酸能通过抑制促炎细胞因子IFN-β、IFN-γ、IL-1、IL-17A、IL-22和TNF-α的mRNA表达，减轻感染A型产气荚膜梭菌的鸡回肠炎症反应，抑制小肠结构损伤，有效改善感染鸡的生长性能。AkshayBisht[12]等研究表明，绿原酸和姜*素组合可以协调下调促炎因子TNF-α的产生和COX-2酶的基因，抑制NF-kB信号通路活性。
本试验结果说明，饲料中添加七珍素能显著降低输卵管膨大部、峡部、子宫部促炎细胞因子IL-2、IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA水平的表达，同时还观察到抑炎因子IL-4、IL-10mRNA水平的显著降低。在正常情况下，机体炎症因子的表达处于平衡状态，当机体受到病原体的入侵时，促炎因子的表达相对提高而抑炎因子的表达相对降低使机体处于免疫应答状态。金银花属于清热解*药物，其发挥抗炎作用的机制是抑制炎症相关因子的表达或产生。本试验选择产蛋后期的蛋鸡为研究对象，饲料中添加七珍素后使输卵管促炎因子水平降低，机体为了维持相对平衡状态，抑炎因子的水平也相应降低。其中，膨大部和峡部细胞因子mRNA水平的表达下降倍数均高于子宫部，说明七珍素对蛋鸡输卵管膨大部和峡部的作用更敏感。
4结论（1）从产蛋性能方面，基础饲料中添加七珍素可以提高蛋鸡产蛋率、产蛋量，降低无壳蛋率、沙皮蛋率、脏蛋率和水纹蛋比率，其中g/t添加量性价比最优。
（2）添加七珍素能减轻输卵管组织学病变，提高输卵管抗氧化能力以及减轻输卵管的炎症反应，相比于子宫部，七珍素对输卵管膨大部和峡部作用更显著。
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本文为“生泰尔”原创稿件，若转载请标注来源“北京生泰尔科技股份有限公司”或“生泰尔饲料添加剂技术平台”作者：吕慧源数据来源：生泰尔与中国农业大学联合研究试验（未发表）预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇